IOS下载  IOS下载
IOS下载二维码
手机扫描二维码
Android下载  Android下载
手机扫描二维码

用甲醛滴定法测定氨基氮

发布时间 2010-01-18 浏览量 作者: 无 来源: 无

(一)实验目的:
    初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点.
(二)原理:
    氨基酸是两极电解质,在水溶液中有如下平衡:R-CH(N+H3)-COOˉ↔R-CH(NH2)COOˉ+H+-N+H3是弱酸,完全解离时PH为11-12或更高,若用碱滴定-N+H3释放的H+来测量氨基酸,一般指示剂变色域小于10,很难准确指示终点.
    常温下,甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合,生成羟甲基化合物,使上述平衡右移,促使-N+H3释放H+,使溶液的酸度增加,滴定终点移至酚酞的变色域内(PH9.0左右).因此,可用酚酞作指示剂,用标准的氢氧化钠溶液滴定.
(三)操作:
    1、取3个25ml的锥形瓶,编号.向第1、2号瓶内各加入0.1当量/升的标准甘氨酸溶液2ml和水5ml,混匀.向3号瓶内加入7ml水.然后向三个瓶中各加入5滴酚酞指示剂,混匀后各加入2ml甲醛溶液再混匀,分别用0.1当量/升标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红色.
    重复以上实验2次,记录每次每瓶消耗标准氢氧化钠溶液的毫升数.取平均值,计算甘氨酸氨基氮的回收率.
    甘氨酸氨基氮的回收率为实际测得量与加入理论量的比值.
    实际测得量为滴定第1和2号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数的平均值与第3号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液毫升数之差乘以标准氢氧化钠的当量浓度,再乘以14.008.
    2ml乘以标准甘氨酸的当量浓度再乘14.008,即为加入理论量的毫克数.
    2、取未知浓度的甘氨酸溶液2ml,依上述方法测定,平行做几份,取平均值.计算每毫升甘氨酸溶液中含氨基氮的毫克数.
    氨基氮(mg/ml)=(V末—V对)×NNaOH×14.008/2
    公式中V末为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数.V对为滴定对照液(3号瓶)耗用标准氢氧化钠溶液的平均毫升数.NNaOH为标准氢氧化钠溶液的真实当量浓度.

相关阅读:
tRNA氨基酸接受末端在蛋白质生物合成及其精确性调控中的作用
较高的维生素B6及常见氨基酸的血浓度与较低的肺癌风险有关
DNA甲基化PCR引物的设计
JBC:机体存在DNA主动去甲基化调控机制


 


回到顶部