材料:
缓冲液和溶液:
    SM,氯仿
培养基:
    NZCYM
载体和菌株:
    高滴度的λ噬菌体原种
离心机和转子:
    Sorvall  SS-34或相当型号
专用设备:略

方法:
1、接种大肠杆菌适宜菌株的单菌落至分装在500ml锥形瓶的100mlNZCYM中,37℃剧烈振荡培养过夜.
2、测定培养物的OD600值,以1OD600=1×109个细胞/ml计算细胞浓度.
3、取4份样品,每份含1010个细胞,4000g(5800r/min 于Sorvall  SS-34)室温离心10min,去上清.
4、将每份细菌沉淀用3ml SM悬浮.
5、加入适当数量的感染性噬菌体颗粒,振荡使噬菌体充分分散于整个培养物中.
6、将感染培养物37℃温育20min,间或摇晃.
7、将每份感染样品加入到预热至37℃的500ml NZCYM(于2L 烧瓶中),37℃剧烈振荡培养(300r/min).
8、8h后开始监视培养物的裂解情况.伴随着细菌和噬菌体的生长,8-12h后裂解发生,如果观察大裂解发生,转入步骤10.
9、假如12h后裂解不明显,取小量培养物样品,检查噬菌体的生长情况.
  a．取两份感染培养物样品(每份1ml)至玻璃试管中.
  b．每管中加入1至2滴氯仿(约50-100ml),37℃培养5-10min,间或摇晃.
  c．将每管置光线下比较培养物的外观.如果接近完全感染但细胞还没有裂解,氯仿将导致细胞破裂,从而使混浊的培养物变为透明.在这种情况下,转入步骤10.
10、每个烧瓶中加入10ml氯仿,37℃继续振荡培养10min.
11、将培养物冷却至室温,随之用方案6所述沉淀噬菌体颗粒.

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