1 ）细胞株的培养和传代 

    培养：
    用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含 10 ％小牛血清和抗生素的培养液中,培养细胞因子依赖细胞株还有加入适量细胞因子.在 37 ℃ 5 ％ CO₂ 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养, 3 ～ 4 天传代一次. 

    悬浮生长细胞的传代： 
    直接吸去或离心后吸去培养上清液,用新鲜培养液悬浮细胞, 1 ： 3 或 1 ： 5 稀释细胞后,分瓶继续培养. 

    帖壁生长细胞的传代： 
    吸去培养液,用 PBS 洗涤细胞一次,加入消化液,在 37 ℃中消化约 3 ～ 10 分钟,待细胞开始脱落时,倒去消化液,加入新鲜培养液,悬浮和吹打分散细胞.也可以待细胞完全消化脱落, 500 × g 离心 5 分钟,去除消化液,用新鲜培养液悬浮细胞. 1 ： 3 或 1 ： 5 稀释细胞后,分瓶继续培养.

2 ）细胞株的冻存： 

    1 ． 取培养 2 ～ 3 天生长旺盛的细胞,用细胞培养液将细胞配成 2 × 10⁶ ～ 2 × 10⁷/ml .
    2 ． 在 1ml 细胞冻存管中加入 0.5ml 细胞悬液, 0.4ml 小牛血清和 0.1ml 二甲基亚砜（或甘油）,混匀后密封.置 4 ℃ 1 小时,－ 20 ℃ 2 小时,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上过夜后浸入液氮中.

3 ）细胞株的复苏： 

    复苏时,从液氮中取出冻存管,立即置 37 ℃水浴中融化细胞.将细胞直接加入 10ml 含 15 ％小牛血清的 RPMI-1640 培养液中,置 37 ℃ 5 ％ CO₂ 饱和水汽二氧化碳培养箱中培养.悬浮细胞待细胞全部沉降后小心吸去上清液,更换新鲜的上述培养液,继续培养；帖壁细胞则培养 2 ～ 3 天.