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植物组织水势的测定(小液流法)

发布时间 2010-01-11 浏览量 作者: 无 来源: 无

一、实验原理:
    在植物生理学上,水势定义为单位摩尔体积水的化学势(即自由能),是植物水分能量状况的基本度量单位.由于水势的绝对值不易测得,一般以同样温度和大气压下纯水的水势作为零点,其他溶液与纯水相比而测得其相对水势.植物组织的水势决定着其与外界环境之间水分交换,若植物组织的水势低于外液的渗透势 (溶质势,即溶液的水势),组织吸水从而使得外液的浓度变大,比重增加;反之,若植物组织的水势高于外液的渗透势,即组织失水使得外液浓度变小,比重降 低;若两者相等,则水分交换保持动态平衡,外液浓度、比重保持不变.因此,要测定植物组织的水势,可将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中,若找到某 一浓度的溶液在放入植物组织前后的比重不变,则可认为其与植物组织之间水分保持动态平衡,该溶液的渗透势等于植物组织的水势.因溶液的浓度是已知的,可根据公式算出其渗透压,取其负值即为溶液的渗透势(ψπ),代表植物的水势(ψw ).ψw =ψπ =-P=-CRT
二、材料、仪器设备和试剂
(一)材料:小白菜或其他作物叶片
(二)仪器设备:带塞青霉素小瓶12个,带针头的注射器,镊子,打孔器,记号笔,培养皿
(三)试剂:
    (1)蔗糖系列标准溶液:称取预先在60-80℃下烘干的蔗糖34.2g,溶于70ml蒸馏水中,容量瓶定容至100ml,得到1mol/L标准蔗 糖溶液.然后用1mol/L标准蔗糖溶液分别稀释成为0.10mol/L、0.20mol/L、0.30mol/L、0.40mol/L、0.50mol /L、 0.60mol/L蔗糖溶液.
    (2)甲烯蓝粉末
三、实验步骤
(1)取干燥洁净的青霉素瓶9个为甲组,各瓶中分别加入0.10-0.60mol/L蔗糖溶液约4ml(约为青霉素小瓶的2/3处),另取6个干燥洁净的青霉素 瓶为乙组,各瓶中分别加入0.10-0.60mol/L蔗糖溶液4ml和微量甲烯蓝粉末着色,上述各瓶用记号笔注明浓度.
(2)取待测样品的功能叶数片,用打孔器打取小圆片约50片,放至培养皿中,混合均匀.用镊子分别夹入5-8个小圆片到盛有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的青霉素瓶中(乙组).盖上瓶塞,并使叶圆片全部浸没于溶液中.放置约40min,为加速水分平衡,应经常摇动小瓶.
(3)经一定时间后,用注射器针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许,将针头插入对应浓度甲组青霉素瓶溶液中部,小心地放出少量流液,观察蓝色液流的升降方 向(每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头).如此方法检查各瓶中液流的升降动向.若液流上升,说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小(即 植物组织失水),表明叶片组织的水势高于该浓度溶液的渗透势;如果蓝色液流下降,则说明叶片组织的水势低于该浓度的渗透势;若蓝色液流静止不动,则说明叶 片组织的水势等于该浓度溶液的渗透势;如果在前一浓度溶液中下降,而在后一浓度溶液中上升,则叶片组织的水势即为二种浓度溶液的渗透势的平均值.
四、计算结果
    根据下列公式计算叶片组织的水势:ψw=ψπ =-CRTi(MPa)式中:ψw为植物组织的水势(MPa); ψπ为溶液的渗透势(MPa); R为气体常数,0.008 314L·Pa/(mol·K);T为绝对温度(273+ t ℃)K;i为解离系数(蔗糖=1,CaCl2=2.60)
五、注意
1. 叶片大小、数目要相等,否则易产生小液流移动方向在不同浓度下波动的结果,以至无法确定植物组织水势.
2. 甲烯蓝不宜加得过多(溶液呈稍深的蓝色即可),否则将使实验组各管中溶液的比重均加大.
3. 如果溶液的浓度范围不够,可以在本系列前后递增几个蔗糖溶液.

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