1、玻璃板对齐后放入夹中卡紧.然后垂直卡在架子上准备灌胶.(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶.)
2、先配分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶.灌胶时,可用10ml枪吸取5ml胶沿玻璃放出,待胶面升到所需高度时即可.然后胶上加一层水,液封后的胶凝的更快.(灌胶时开始可快一些,胶面快到所需高度时要放慢速度.操作时胶一定要沿玻璃板流下,这样胶中才不会有气泡.加水液封时要很慢,否则胶会被冲变型.)
3、当水和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝了.再等3min使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干.
4、配好浓缩胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶.将剩余空间灌满浓缩胶然后将梳子插入浓缩胶中.灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生.插梳子时要使梳子保持水平.由于胶凝固时体积会收缩减小,从而使加样孔的上样体积减小,所以在浓缩胶凝固的过程中要经常在两边补胶.待到浓缩胶凝固后,两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出.

注意事项:
①.玻璃板一定要洗干净;
②.分离胶和浓缩胶的PH值一定要准;
③.APS至少两周换一次;
④.加浓缩胶前确保封胶的水已被吸干;
⑤.根据目的蛋白的分子量选择适当的分离胶与浓缩胶的浓度;

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