细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究. 
 由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养.原代培养细胞离体时间短,性状与体内相似,适用于研究. 
 幼稚状态的组织和细胞,如：动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养

原代细胞培养操作（鼠胎组织细胞培养为例）
    1 、取材：用颈椎脱位法使孕鼠迅速死亡.把整个孕鼠浸入盛有 75 ％乙醇的烧杯中消毒 3-5 分钟,取出后放在大平皿中携入超净台.用消过毒的剪刀在躯干中部环行剪开皮肤,剖腹取出子宫置于无菌平皿中.用消过毒的剪刀剪开子宫,取出鼠胎,剪去头、爪,以平衡盐溶液洗去血污
    2 、切割：用平衡盐溶液将取出的组织块清洗三次,然后用眼科手术剪刀仔细将组织反复剪碎,直到成 1mm3 左右的小块,再用平衡盐溶液清洗,洗到组织块发白为止.静置数分钟,使组织块自然沉淀到管底,弃去上清
    3 、消化、接种培养：加入 0.25 ％胰蛋白酶消化液（ 5-10 倍量）,与组织块混匀.置 37 ℃水浴,观察消化情况（每隔几分钟摇动一下试管）,静止,吸去上清,加入 5 ～ 10ml 细胞培养液,用吸管吹打混匀,移入二个培养瓶中,置于二氧化碳培养箱中培养
    细胞接种后一般几小时内就能贴壁,并开始生长,如接种的细胞密度适宜, 5 天到一周即可形成单层.

传代细胞培养原理 
 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以 1:2 或 l:3 以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养. 
 细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同.在一代中,细胞培增 3 ～ 6 次.

传代细胞培养操作
 将长成单层的细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液 ( 以液面盖住细胞为宜 ) ,静置 5 ～ 10 分钟,在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入 3 ～ 5ml 新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液. 
 将细胞悬液吸出 2ml 左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加 3ml 左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养 
 一般情况,传代后的细胞在 4 小时左右就能附着在培养瓶壁上, 2 ～ 4 天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代


细胞计数及活力测定
实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目.
具体操作：
    1、盖好盖玻片：取血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上.  
    2、制备计数用的细胞悬液： 0.5ml 细胞悬液到一离心管中,加入 0.5ml 台盼蓝染液（ 0.4 ％）或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞.  
    3、将细胞悬液滴入计数板：将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中.
    4、统计四个大格的细胞数：将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,分别数出四角的四个大铬（每个大格含有 16 个中铬）中死细胞和活细胞数.
    5、计算原细胞悬液的细胞数 : 按照下面公式计算细胞密度：
    （细胞悬液的细胞数） /ml ＝（四个大格子细胞数 /4) × 2 × 104
    说明：公式中除以 4 因为计数了 4 个大格的细胞数. ? 公式中乘以 2 因为细胞悬液于染液是 1 ： 1 稀释.
    公式中乘以 104 因为计数板中每一个大格的体积为： 1.0mm （长）× 1.0mm （宽）× 0.1mm （高）＝ 0.1mm3  而  1ml ＝ 1000mm3