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天然生物成分检出试剂配制法

发布时间 2010-02-03 浏览量 作者: 无 来源: 无

一、生物碱沉淀试剂:
1、碘化铋钾(Dragendorff)试剂:
    取次硝酸铋3g溶于30%硝酸(比重1.18)17ml中,在搅拌下慢慢加碘化钾浓水溶液(27克碘化钾溶于20ml水),静置一夜,取上层清液,加蒸馏水稀释至100ml.
    附:改良的碘化铋钾试剂:甲液:0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸,加水40ml. 乙液:8g碘化钾溶于20ml水中.溶液甲和乙等量混合,于棕色瓶中可以保存较长时间,可作沉淀试剂用,如作层析显色剂用,则取上述混合液1ml与醋酸2ml,混合即得.
    目前市场上碘化铋钾试剂可直接供配制:7.3g碘化铋钾,冰醋酸10ml,加蒸馏水60ml.
2、碘化汞钾(Mayer)试剂:
    氯化汞1.36g和碘化钾5g各溶于20ml水中,混合后加水稀释至100ml.
3、碘一碘化钾(Wagner):试剂:
    1g碘化钾液于50ml,加热,加2ml醋酸,再用水稀释至100ml.
4、硅钨酸试剂:
    5g硅钨酸溶于100ml水中,加盐酸少量至pH2左右.
5、苦味酸试剂:
    1g苦味酸溶于100ml水中.
6、鞣酸试剂:
    鞣酸1g加乙醇1    ml溶解后再加水至10ml.
7、碱酸铈——硫酸试剂:
    0.1g硫酸铈混悬于4ml水中,加入1g三氯醋酸,加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清.

二、苷类检出试剂:

(一)糖的检出试剂:
1、碱性酒石酸铜(Fehiling)试剂:本口分甲液与乙液,应用时取等量混合.
    甲液:结晶硫酸酮6.23g,加水至100ml.
    乙液:酒石酸钾钠34.6g,及氢氧化钠10g,加水至100ml.
2、ɑ-萘酚(Molisch)试剂.
    甲液:ɑ-萘酚1g,加75%乙醇至10ml.
    乙液:浓硫酸
3、氨性硝酸银试剂:硝酸银1g,加水20ml溶解,注意滴加适量的氨水,随加随搅拌,至开始产生的沉淀将近全溶为止,过滤.
4、ɑ-去氧糖显色试剂
(1)三氯化铁冰醋酸(Keller-Kiliani)试剂
    甲液:1%三氯化铁溶液0.5ml,加冰醋酸至100ml.
    乙液:浓硫酸.
(2)占吨氢醇冰醋酸(Xanthydrol)试剂:10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸(含1%的盐酸中)


(二)酚类:
1、三氯化铁试剂:5%三氯化铁的水溶液或醇溶液.
2、三氯化铁一铁氰化钾试剂:
    甲液:2%三氯化铁水溶液
    乙液:1%铁氰化钾水溶液
    应用时甲液、乙液等体积混合或分别滴加.
3、4一氨基氨替比林一氨氰化钾(Emerscn)试剂:
    甲液:2%4-氨基安替比林乙醇液
    乙液:3%铁氰化钾水溶液,(或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液).
4、重氮化试剂:本试剂系由对硝基苯胺和亚硝酸钠在强酸下经重氮化作用而成,由于重氮盐不稳定很易分解,所本试剂应临用时配制.
    甲液:对硝基苯胺0.35g,溶于浓盐酸5ml,加水至50ml.
    乙液:亚硝酸钠5g,加水至50ml
    应用时取甲、乙液等量在冰水浴中混合后,方可使用.
5、Gibb试剂:
    甲液:0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇溶液.
    乙液:硼酸一氯化钾一氢氧化钾缓冲液(pH9.4).
    [注]试剂配制法中:1.水是指蒸馏水;2.不指出溶剂的即为水溶液;3.醇指95%;4.试剂配制后应澄清,如不澄清可过滤.

(三)内酯、香豆素类:

1、异羟肟酸铁试剂
    甲液:新鲜配制的1N羟胺盐酸盐(M=69.5)的甲醇液.
    乙液:1.1N氢氧化钾(M=56.1)的甲醇液
    丙液:三氯化铁溶于1%盐酸中的浓度为1%的溶液.
    应用时甲、乙、丙三液体按次序滴加,或甲、乙两液混合滴加后再加丙液.
2、4-氨基安替比林一铁氰化钾试剂(见二一(二)-3).
3、重氮化试剂:(见二一(二)-4).
    进行2、3试验时样品应先加3%碳酸钠溶液加热处理,再分别滴加试剂.
4、开环一闭环试剂
    甲液:1%氢氧化钠溶液.
    乙液:2%盐酸溶液.


(四)黄酮类:
1、盐酸镁粉试剂:浓盐镁和镁粉
2、三氯化铝试剂:2%三氯化铝甲醇溶液
3、醋酸镁试剂:1%醋酸镁甲醇溶液
4、碱式醋酸铅试剂:饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液.
5、氢氧化钾试剂:10%氢氧化钾水溶液.
6、氧氯化锆试剂:10%氧氯化锆甲醇溶液.
7、锆一枸橼酸试剂:
    甲液:2%氧氯化锆甲醇液.
    乙液:2%枸橼酸甲醇液.

(五)蒽醌类:

1、氢氧化钾试剂:10%氢氧化钾水溶液.
2、醋酸镁试剂:105醋酸镁甲醇溶液.
3、1%硼酸试剂:1%硼酸水溶液.
4、浓硫酸试剂:浓硫酸.
5、碱式醋酸铅试剂:(见二一(四)一4).

(六)强心苷类:

1、3,5-二硝基苯甲酸(Kedde)试剂.
    甲液:2%3,5-二硝基苯甲酸甲醇液.
    乙液:1N氢氧化钾甲醇溶液:
    应用前甲、乙两液等量混合.
2、碱性苦味酸(Baljet)试剂:
    甲液:1%苦味酸水溶液.
    乙液:10%氢氧化钠溶液.
3、亚硝基铁氰化钠一氢氧化钠的(Legal)试剂:
    甲液:吡啶
    乙液:0.5%亚硝基铁氰化钠溶液.
    丙液:10%氢氧化钠溶液

(七)皂苷类:

1、溶血试验:
    2%血球生理盐水混悬液:新鲜兔血(由心脏或耳静脉取血),适量,用洁净小毛刷迅速搅拌,除去纤维蛋白并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后,量取沉降红血球用生理盐水配成2%混悬液,贮冰箱内备用(贮存期2~3天).
2、醋酐一浓碱酸(Liebermann)试剂:
    甲液:醋酐.
    乙液:硫酸.
3、浓硫酸试剂,浓硫酸.


(八)含氰苷类:
1、苦味酸钠试剂:适当大小的滤纸条,浸入苦味酸饱和水溶液;浸透后取出晾干,再浸入10%碳酸钠水溶液内,迅速取出晾干即得.
2、亚铁氰化铁(普鲁士兰)试剂:
    甲液:10%氢氧化钠液.
    乙液:10%硫酸亚铁水溶液,用前配制.
    丙液:10%盐酸.
    丁液:5%三氯化铁液.

三、萜类、甾体类检出试剂:

1、香草醛一浓硫酸试剂:5%香草醋浓硫酸液(或0.5g香草醛溶于100ml硫酸一乙醇(4:1)中).
2、三氯化锑(Carr-Price)试剂:25g三氯化锑溶于15g氯仿中(亦可用氯仿或四氯化碳的饱和溶液).
3、五氯化锑试剂:五氯化锑一氯仿(或四氯化碳)1:4,用前新鲜配制.
4、醋酐一浓硫酸试剂:(见二一(七)一2).
5、氯仿一浓硫酸试剂:
    甲液:氯仿(溶解样品).
    乙液:浓硫酸.
6、间二硝基苯试剂:
    甲液:2%间二硝基苯乙醇液.
    乙液:14%氢氧化钾甲醇液.
    用前甲、乙两液等量混合.
7、三氯醋酸试剂:3.3g三氯醋酸溶于10ml氯仿,加入1~2溶过氧化氢.

四、鞣质类检出试剂:

1、三氯化铁试剂
2、三氯化铁一铁氰化钾试剂
3、4-氨基安替比林一铁氰化钾试剂
4、明胶试剂:10g氯化钠,1g明胶,加水至100ml.
5、醋酸铅试剂:饱和醋酸铅溶液.
6、对甲基苯磺酸试剂:20%对甲基苯磺酸氯仿溶液.
7、铁铵明矾试剂:硫酸铁铵结晶(FeNH4(SO4)12H2O)lg,加水至100ml.

五、氨基酸多肽、蛋白质检出试剂:
1、双缩脲(Biuret)试剂:
    甲液:1%硫酸铜溶液.
    乙液:40%氢氧化钠液.
    应用前等量混合.
2、茚三酮试剂:0.3g茚三酮溶于正丁醇100ml中,加醋酸3ml(或0.2g茚三酮溶于100ml乙醇或丙酮中).
3、鞣酸试剂:(一6)


六、有机酸检出试剂:
1、溴麝香草酚兰试剂:0.1%溴麝香酚兰(或溴酚兰、或溴甲酚绿)乙醇液.
2、吖啶试剂:0.005%吖啶乙醇液.
3、芳香胺一还原糖试剂,苯胺5g,水糖5g溶于50%乙醇溶液中.

七、其它检出试剂:
1、重铬酸钾一硫酸
    5g重铬酸钾溶于100ml 40%硫酸.
2、萤光素一溴:
    甲液:0.1%萤光素乙醇液
    乙液:5%溴的四氯化碳溶液.
    甲液喷、乙液熏.
3、碘蒸气
4、硫酸液:5%硫酸乙醇液,或15%浓硫酸正丁醇液.或浓硫酸一醋酸(1:1).
5、磷钼酸、硅钨酸或钨酸试剂:3~10%磷钼酸或钨酸乙醇液.
6、碱性高锰酸钾试剂:
    甲液:1%高锰酸钾液.
    乙液:5%碳酸钠液,用时等体积混合.
7、2,4-二硝基苯肼试剂:取2,4-二硝基苯肼配成0.2% 2N盐酸溶液或0.1 2%盐酸乙醇液.

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