真菌的一般检验法为直接镜检观察是否有菌丝、孢子或菌体,检出循环抗原等.直接镜检对真菌病诊断很重要,尤其对威胁生命的真菌病,快速、准确的非培养诊断法是非常必要的.
    不染色标本直接镜检除部分深部感染真菌可初步确定菌种外,大部分浅部感染真菌仅能确定真菌菌丝和有无孢子,很难确定为何种真菌感染.
1、材料:
①标本.甲屑、皮屑、毛发等固体标本；脓汁、尿沉渣、分泌物等液体标本.
②试剂.100g/lNaOH或KOH溶液；生理盐水.
③其他.小镊子、盖玻片、载玻片.
2、方法:
(1)制片方法:将甲屑、皮屑、毛发等 固体标本置灭菌洁净载玻片上,加一滴封固剂(100g/lNaOH或KOH溶液),盖上盖玻片,微加热使角质软化,轻压盖玻片,使标本变薄、透明,并驱除气泡.脓汁、尿沉渣、分泌物等标本仅用无菌生理盐水稀释即可.
(2)检验方法:先用低倍显微镜检查,当查到可疑为真菌孢子或菌丝时,再换高倍镜检查,观察记录菌丝和孢子.许多标本不需染色即可直接镜检.如观察分生孢子的发育需放大1000倍.有些结构如分生孢子梗上产生的瓶梗需用相差显微镜才看得清楚.某些病原性真菌如荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌感染病人标本中,直接检出与这些病原菌形态特征符合的真菌时,结合临床表现容易作出明确诊断.如果检出的是正常菌群,要确定其病原性比较困难.在酸中毒的糖尿病病人暴发急性感染时,如检出宽或波形不分隔的菌丝则应考虑毛霉菌病.直接检出的结果也有助于实验室进一步诊断,有助于采取恰当的检验步骤和措施(如选择特殊的培养基和确定适宜的孵育时间).但是,直接检查也有其局限性,因为阴性结果也不能排除真菌感染,直接检查不如培养法敏感,其敏感性也随标本类型、数量、采集 时间和质量等而有不同；也有假阳性结果,溶解的淋巴细胞在脑脊液印度墨汁湿片中易误认为新型隐球菌；脂肪微滴也可能与出芽酵母细胞混淆.出现可疑结果时应进行复查,或采用其他检验步骤.除花斑癣病原菌培养有困难只能依据直接镜检诊断外,一般标本应进一步作培养检查.

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